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宏基因组项目文章|深海冷泉中功能基因的系统发育多样性:宏基因组学的新视角

 

 简介 

 

该研究开发了REMIRGE流程,从宏基因组测序reads中重建全长功能基因,并充分探索了冷泉沉积物中关键基因的系统发育多样性。研究发现参与甲烷、硫和氮循环的功能基因的丰度和多样性在非冷泉点和5个冷泉点存在差异,且在海马冷泉的CS位点在不同深度上存在功能类群的分异,还发现相关基因的特定基因序列簇之间存在正相关,表明耦合发生在特定功能类群之间。龙8总区基因提供本研究中ONT宏基因组的测序支持。

 

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英文标题:Phylogenetic diversity of functional genes in deep-sea cold seeps: a novel perspective on metagenomics

中文标题:深海冷泉功能基因的系统发育多样性:宏基因组学的新视角

发表期刊:Microbiome

影响因子:15.5

发表时间:2023年12月15日

作者及单位:一作、通讯作者及单位:王丹蕊(第一作者),邓晔(通讯作者),中国科学院生态环境研究中心

 

 分析流程 

 

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 部分主要结果 

 

1.海马冷泉的菌群结构

 

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本研究共涉及6个取样点,其中NS为非冷泉样本,CS1-4为不同深度的海马冷泉样本,HM1、HM5、SF、HY为公开数据库中的冷泉样本数据集。使用MCycDB、SCycDB和NCycDB来计算单个样本功能基因的丰度(蓝-红区块)以及每个功能基因的总丰度(白-绿区块),CS呈现出参与甲烷、硫和氮循环的不同基因,表明CS具有巨大代谢潜力。

 

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根据Mantel分析,大多数环境因子与SSU rRNA基因显著相关,表明多种环境因子共同影响海马冷泉的菌群。门类水平的注释显示,Halobacterota(包括ANME)和Desulfobacterota(包括SRB)是冷泉中丰度最高的两个门,说明由ANME和SRB介导的硫酸盐依赖型厌氧甲烷氧化(SAMO)很可能是海马冷泉的主要生物地球化学过程。

 

2.不同位置冷泉的功能基因

 

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GSCs(基因序列簇)的功能基因多样性,包括分类多样性(qD)和系统发育多样性(qPD)。mcrA基因在分类多样性上表现出显著差异,但3个地点(CS、HM1和HM5)的qPD剖面相对相似,说明mcrA的GSC丰度较不均匀。CS和HM5更高的mcrA、dsrA和nifH的多样性和丰度,表明在该点存在AOM(甲烷厌氧氧化)、硫酸盐还原和固氮过程。结果表明mcrA、dsrA、nifH、narG和nosZ的系统发育多样性在不同位置的冷泉之间存在差异。

 

3.不同沉积物深度下不同的功能基因

 

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不同沉积层之间代表性功能基因的丰度差异不大,但REMIRGE流程在系统发育上发现了显著的深度分异。对于AOM相关功能基因PCoA分析结果,大多数NS、CS1、CS2和CS3-4都形成四个不同的簇。

 

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相较于SSU rRNA和dsrA,迭代产生的mcrA的GSC所占比例明显更多,可能是因为现有mcrA数据库不完整,通过迭代法获得了更多新mcrA的GSC。总的来说,与AOM和固氮相关的功能基因在冷泉区深层具有更高的多样性,而其他大多数基因在表层具有更高的多样性。

 

4.在特定的基因序列簇之间的耦合

 

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基于dsrA和mcrA之间的Pearson相关性分析,约77%的dsrA GSC来源于海洋环境,而23%的谱系是其他环境的。位于图底部的一个支系包含6个dsrA GSCs,与大多数mcrA GSCs有很强的相关性,这一支系被注释为Desulfobacteraceae或Desulfovibronaceae。但Desulfobacteraceae或Desulfovibronaceae的dsrA GSC没有都聚集在一起,有些GSC与mcrA GSC呈负相关。推测并非所有功能互补的类群都会发生耦合,SRB的特定成员与多种ANME发生耦合,从而主导SAMO过程。

 

5.冷泉区和非冷泉区的代谢通路偏好

 

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基于丰度、多样性和系统发育多样性构建了初级代谢过程概念图,重点研究冷泉区和非冷泉区甲烷循环及相关硫氮循环的六个关键过程。发现甲烷的厌氧氧化几乎完全发生在CS位点,特别是下层,因CS2-4中mcrA GSCs的丰度和多样性均高于CS1。CS同时存在异化硫酸盐还原(DSR)和同化硫酸盐还原(ASR)两种途径,而NS位点以ASR为主。SOX系统只在冷泉区表层被检测到。与固氮相关的nifH基因主要出现在CS地点的深层,而与反硝化相关的基因主要出现在表层。

 

 小结 

 

本研究的分析流程集成了基于读数的技术和基于组装的技术,同时保持了针对性和非针对性之间的平衡,对参考数据库中的错误和遗漏具有很强的鲁棒性。通过将REMIRGE应用于冷泉数据集对系统发生有了更深入的了解,并对微生物多样性进行了更全面的评估。本文提供了分析脚本和在线分析平台(//remirge.denglab.org.cn),这一创新性分析流程具有探索各种环境的潜力,在促进了解功能类群及其对生态系统过程的贡献方面有广泛应用前景。 

 

参考文献:

Wang D, et al., Phylogenetic diversity of functional genes in deep-sea cold seeps: a novel perspective on metagenomics. Microbiome. 2023.


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