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龙8总区微讲堂（第6期）——耶氏肺孢子菌
肺孢子菌于1906年在龋齿动物中被首次发现，最初被认为是原生动物。后通过对其核糖体小亚基 rRNA 的系统发育分析证实其属于单细胞真菌，归类为真菌界肺孢子菌属。有5种肺孢子菌被正式命名:耶氏肺孢子菌、卡氏肺孢子菌、瓦氏肺孢子菌、鼠肺孢子菌和兔源肺孢子菌。
肺孢子菌寄生于肺泡内，以包囊和滋养体的形式交替存在，成熟包囊进入肺泡后破裂，包囊中的子孢子释放，发育成滋养体，这些滋养体成熟形成包囊，释放子孢子。
耶氏肺孢子菌是一种常见的机会性致病真菌，感染部位一般局限在肺部，引起肺炎，但是也可能播散到淋巴结、肝、脾和骨髓等。由耶氏肺孢子菌感染肺部所致的肺炎称为耶氏肺孢子菌肺炎（PJP），该病主要感染途径为空气传播和体内潜伏状态耶氏肺孢子菌的激活。耶氏肺孢子菌肺炎潜伏期约4周，初期表现为食欲缺乏、体重减轻，继而出现干咳、发热、发绀、呼吸困难，很快发生呼吸窘迫，未及时发现和治疗者病死率高达70%-100%。
耶氏肺孢子菌肺炎通常发生在HIV感染、自身免疫性疾病、恶性肿瘤或免疫抑制剂治疗的免疫功能低下患者。艾滋病患者通常病程较长，进展较慢，可能仅表现为轻度运动不耐症或胸闷，而无发热或咳嗽，X线胸片多正常或接近正常，进展数日、数周甚至数月后，开始出现发热、咳嗽、弥漫性肺泡浸润和严重低氧血症。少数艾滋病患者和大多数免疫抑制晃着可能出现急性起病，在几日内即可发展为呼吸衰竭，对于此类患者，综合其他风险因素，应考虑尽早进行PJP的预防性治疗。
实验室检查指标包括LDH、BG、CD4+T淋巴细胞、KL-6等，对PJP临床诊断有重要价值。此外，年龄、LDH、白细胞计数、淋巴细胞比率、动脉氧分压及是否合并细菌和/或曲霉感染与PJP患者预后关系密切。
目前国内主要依靠病原学检查明确耶氏肺孢子菌感染的诊断。由于耶氏肺孢子菌至今仍不能在体外进行培养，故主要通过病理染色、免疫检测，分子生物学检测来辅助诊断，近来，高通量测序技术被广泛应用于微生物的鉴定，显示出较高的敏感性和特异性。
01病理染色
常用吉姆萨, 六胺银, 甲苯胺蓝，瑞-吉等染色方法来检测样本中是否存在耶氏肺孢子菌。
六胺银染色
02免疫学检查
利用免疫染色，ELISA 等技术可检测耶氏肺孢子菌特异性的抗原抗体。利用Fungitell测试可检测血液中耶氏肺孢子菌细胞壁1,3-β-D-葡聚糖的水平。此外血清乳酸脱氢酶显著升高也可以作为辅助诊断指标。
03分子生物学检测
利用DNA 探针、rDNA 探针、PCR（聚合酶链反应）及LAMP（循环介导等温扩增）可检测样本中耶氏肺孢子菌的特定基因序列。这种方法具有高度的特异性和敏感性，可以检测非创伤手段采集的标本及已经实施预防性用药的患者标本。
04高通量测序
高通量测序可用于分析和鉴定微生物群落，提供感染病原体的种类、数量、功能、耐药性等重要信息，是临床辅助诊断的良好工具。
龙8总区医学精准检测助力疾病防控
龙8总区医学TNPD®靶向纳米孔病原检测系列产品，采用自主研发的超多重PCR联合纳米孔测序专利技术，可快速检测耶氏肺孢子菌、甲/乙型流感病毒、支原体在内的多种病原体核酸和耐药基因，为感染患者提供快速精准的诊断依据，指导药物的合理应用。
